猫瘟病毒检测卡(kǎ)由预包被猫瘟病毒重组(zǔ)E2卵白的酶标板、酶标记物及其余配套试剂构成,利用酶联免疫法(ELISA)道理检测猪血(xuè)清、血(xuè)浆样本中(zhōng)猫瘟病毒抗(kàng)体。尝试时在酶标板中(zhōng)插手对比血(xuè)清和待检样本,经温育后若样品中(zhōng)含有猫瘟病毒抗(kàng)体,则将与酶标板上抗(kàng)原连系,经洗濯撤除未连系的其余成份后.
再插手酶标记物,与酶标板上抗(kàng)原抗(kàng)体复合(hé)物产生特同性连系;再经洗濯撤除未连系的酶标记物,在孔中(zhōng)加TMB底物液,与酶反映构成蓝色产物,显色深浅与样品中(zhōng)的特同性抗(kàng)体含量成正相干;插手停止液停止反映后,产物变为黄色;用酶标仪(yí)在450nm波长测定各反映孔中(zhōng)的吸光值,便可知样品是(shì)不是(shì)含有猫瘟病毒抗(kàng)体。
猫瘟病毒检测卡(kǎ)的查验步骤和方式:
1.利用前将试剂盒置室温30分钟,规复至室温。
2.取所需用量酶标板条,设空缺对比1孔、阳性/阳性对比各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保管。
3.空缺对比孔加样品浓(nóng)缩(suō)液100μl;阴、阳性对比孔别离插手阴、阳性对比100μl;样品孔每孔插手浓(nóng)缩(suō)后的样品100μl。
4.混匀,置37℃反映30分钟。
5.扣去孔内(nèi)液体,每孔加满(mǎn)洗濯液,静置30秒后弃去,反复洗濯5次,拍干。
6.每孔加酶标记物100μl(空缺孔除外)。置37℃反映30分钟。
7.洗濯,同步骤5。
8.每孔顺次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,37℃避光反映10分钟。
9.每孔加停止液50μl,混匀,用空缺孔调零,于450nm(可用630nm作(zuò)参比波长)测定各孔吸光值(A值)。